民国十六年（1927年），1月赴中山大学任教。3月，与中共两广区高官陈延年会见。4月1日，赴黄埔军校发表演讲《革命时代的文学》，12日，“四一二反革命政变”发生，29日，营救进步学生无果愤然辞职。8月，发表《魏晋风度及文章与药及酒之关系》。9月，致信台静农，拒绝作为诺贝尔文学奖候选人，离开广州赴上海，并与许广平在上海开始同居生活。12月，与梁实秋等人就“第三种人”、“自由人”发生论争，双方争论持久，影响巨大。”
民国十七年（1928年）春，参加中国革命互济会。本年，与创造社、太阳社大部分成员就“革命文学”问题展开论争。是年开始大量搜集马克思主义著作，并为之翻译。同时开始提倡革命美术，倡导现代木刻运动。
民国十八年（1929年）9月27日，许广平生子，鲁迅为其取名“周海婴”。年底，与冯雪峰多次磋商组建“中国左翼作家联盟。
民国十九年（1930年）2月，中国自由运动大同盟成立，为发起人之一。3月2日，出席中国左翼作家联盟成立大会，被选为常务委员，作《对左翼作家联盟的意见》演讲。
民国二十年（1931年）1月20日，柔石被逮，鲁迅离寓避难。28日回旧寓。
民国二十一年（1932年）1月29日，遇战事，在火线中。次日避居内山书店。二月六日，由内山书店友护送至英租界内山支店暂避。与艾青等人发起“春地美术研究所”。
民国二十二年（1933年）1月，蔡元培函邀加入“中国民权保障同盟”，被举为执行委员。2月17日，蔡元培函邀赴宋庆龄宅，欢迎萧伯纳。作《为了忘却的纪念》怀念柔石。
民国二十三年（1934年）1月，与郑振铎合编的《北平笺谱》出版。5月，编序之木刻《引玉集》出版。
民国二十四年（1935年）2月开始译乌克兰作家果戈里《死魂灵》。6月，集成《新文学大系·小说二集》并作长序。
民国二十五年（1936年）1月，肩及肋骨皆出现剧痛，最后的创新之作《故事新编》出版。2月，开始续译《死魂灵》第二部。5月15日再发病，医生诊断胃疾，自后发热未愈，5月31日，史沫特莱女士引美国邓医生来诊断，情况不乐观。6月，身体略有好转，鲁迅及身边的人都认为“鲁迅先生好了”。6月9日写《答托洛斯基派的信》，8月5日写《答徐懋庸并关于抗日统一战线问题》，10月写《因太炎先生而想起的二三事》，10月17日旧病复发，18日黎明前疾病发作，气喘不止。